Louise Mushikiwabo est diplômée en études anglaises de l’Université du Rwanda et détient une maîtrise en langues et interprétations de l’Université du Delaware aux États-Unis.
Elle débute sa carrière comme enseignante au Rwanda en 1984, avant d’émigrer aux États-Unis en 1986. Elle occupe plusieurs postes comme traductrice avant de rejoindre la Banque africaine de développement. Elle y travaille au sein du département des communications, avant d’en prendre la direction quelques années plus tard. Elle publie en 2006 un livre Rwanda means the Universe, un mémoire sur la question du génocide rwandais.
C’est en 2008 qu’elle est nommée ministre de l’Information par le gouvernement rwandais. Elle devient ensuite ministre des Affaires étrangères, de la Coopération et de la Communauté de l’Afrique de l’Est de 2009 à 2018. C’est en mars 2018 qu’elle est désignée Secrétaire générale de la Francophonie et c’est en janvier 2019 qu’elle entre en fonction.